Obtención de la proteína verde fluorescente recombinante y su anticuerpo policlonal Igy
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La Proteína Verde Fluorescente (Green Fluorescent Protein, GFP) es ampliamente utilizada en ensayos in vivo e vitro. Se han generado múltiples variantes de esta proteína para diversificar sus características, como la GFP-enhancer (EGFP) que emite una señal fluorescencia 35 veces mayor comparación con silvestre, siendo implementada fusión estudios localización y estabilidad estructural, entre otros. detección puede ser directa o indirecta, mediante el uso anticuerpos anti-GFP. Aunque GFP generalizado evidente utilidad investigación docencia, los insumos su estudio exhiben un alto costo dado deben importados, constituyendo recurso limitado Colombia. El presente trabajo reporta clonación expresión recombinante 6xHisEGFP, cuya purificación se completó a partir fracción soluble insoluble del sistema heterólogo Escherichia coli cromatografía afinidad metales inmovilizados electroforesis preparativa, respectivamente. purificada implementó antígeno producción policlonales aviares (IgY) contra EGFP, cuales obtuvieron desde huevos colectados suero las sangrías gallinas inmunizadas. En este sentido, estrategia metodológica planteada constituye avance desarrollo biotecnológico nacional herramientas moleculares bajo costo.
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ژورنال
عنوان ژورنال: Revista Colombiana de Biotecnología
سال: 2023
ISSN: ['0123-3475', '1909-8758']
DOI: https://doi.org/10.15446/rev.colomb.biote.v25n1.91675